Western blot (Immunoblotting) - Spiega esami
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Western blot (Immunoblotting)
Il western blot o immunofissazione o immunoblot è una tecnica di laboratorio che permette di identificare una determinata proteina in una miscela di proteine, mediante il riconoscimento da parte di anticorpi specifici; la miscela di proteine viene prima separata in base alle loro dimensioni (o peso molecolare)tramite elettroforesi utilizzando un gel di poliacrilammide ; successivamente le proteine vengono trasferite su di un supporto, che comunemente è una membrana di nitrocellulosa che viene tagliato a strisce .
IL siero che deve essere analizzato viene incubato con una striscia e e poi messo a contatto con un antisiero che contiene IgG umane.
Quindi si ottiene un riconoscimento vero e proprio della proteina mediante l'utilizzo di un anticorpo specifico.
Recentemente sono state messe a punto tecniche che permettono il riconoscimento antigene/anticorpo direttamente nella matrice del gel, evitando quindi il trasferimento su membrana.
La metodica viene utilizzata sopratutto in campo virolgico per riconoscere le proteine strutturali dei virus ed è in continua espansione (HIV1, rotavirus, ...vds tabella)
